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RÉGLEMENTATION

Décision n° 8 (1)
Conserves de purée de tomates

ANNEXE
Mode Opératoire à suivre
pour l'Examen des Conserves de Purées de Tomates

Paragraphe 10 - Dénombrement des moisissures (Méthode de Howard)

1° Appareillage

a) Cellule de Howard
Constituée par une lame portant un disque sur lequel on fait l'étalement et 2 supports sur lesquels repose la lamelle.

b) Microscope
1 microscope dont la combinaison "objectif-oculaire" permet d'obtenir un champ d'un diamètre apparent de 1,383 mm de diamètre. Par exemple, avec un microscope Stiassnie, oculaire composé n° 4 et objectif n° 4, il suffit de mettre le tube à la division 19,35 ; avec un microscope Nachet oculaire n° 12 et objectif n° 7, le tube sera placé à la division 19.

L'examen se fait de préférence en lumière de jour en retirant le condensateur et en prenant le miroir plan.

2° Préparation de l'échantillon

a) Nettoyage de la cellule
Afin d'obtenir une préparation avant exactement 0.10 mm d'épaisseur, il est nécessaire que la cellule et la lamelle soient parfaitement propres ; bien laver, essuyer, s'assurer de la présence d'anneaux de Newton (irisation entre la lame et les supports de la cellule).

b) La substance
Le produit à examiner doit présenter un indice de réfraction compris entre 1,3447 et 1,3460 à 20° C (8,5 et 9 du réfractomètre à tomates). Il doit être rendu homogène. Quand ce sera nécessaire de le diluer par apport d'eau distillée, on s'assurera que le mélange présente une homogénéïté parfaite.

c) Mode opératoire
Prélever une parcelle de purée et l'étaler au centre du disque. Il faut qu'une fois la lamelle posée, il n'y ait ni bulles d'air, ni substance débordant le disque.

d) Mise au point du microscope
Régler le microscope en se servant du tube coulissant, de façon qu'en ayant posé une lame portant une graduation micrométrique sur la platine du microscope (micromètre objectif), on obtienne le champ de 1.382 mm de diamètre.

e) Numération
On compte non pas le nombre de filaments, mais le pourcentage de champs positifs par rapport au nombre de champs examinés.
Sont considérés comme champs positifs, les champs contenant des moisissures dont la somme des longueurs de 3 filaments est égale ou supérieure à 1/6 du diamètre du champ. Pour évaluer la longueur des filaments, on peut avoir recours à un disque micrométrique inséré dans l'oculaire du microscope qui divise le champ en carrés dont la longueur de chaque côté représente le 1/6 du diamètre du champ.

Il faut parcourir toute la préparation en laissant entre 2 champs examinés, la valeur d'un champ, jusqu'à ce qu'on ait examiné 5 fois 5 champs (25 champs).

Faire la numération sur quatre préparations successives.

Noter sur une feuille de papier les champs positifs ou négatifs.

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